Phallus eversion sexing in Phrynops geoffroanus (Testudines: Chelidae): a new non-invasive approach

Abstract The sexing of species is an important tool for population management. In tortoises and turtles, sexing is usually done according to secondary characteristics, such as plastron morphology or phallus eversion techniques. In this paper, we present the phallus eversion method and compare its efficiency to other existing techniques. This new method aims at shortening the management time and reducing the physical aftereffects on the animals, fostering the clinical and reproductive management of Geoffroys side-necked turtle (Phrynops geoffroanus) and related species. A sample of fifty individuals was taken in the central region of Piauí state, Northeastern Brazil. The proposed method consisted of moving the head from its resting position. The methods achieving a success rate higher than 80% were compared to each other as for the stimulation time required for phallus eversion. The method as here proposed achieved 100% efficiency in the sex determination of specimens with a linear carapace length between 10 and 34 cm. Also, when compared to the second most efficient method, it substantially reduced the time needed for managing the specimens (91%), avoiding possible sequelae in the individuals handled.

Resumo A sexagem das espécies é uma ferramenta importante para o manejo populacional. Em tartarugas, cágados e jabutis, a sexagem geralmente é feita de acordo com características secundárias, como morfologia do plastrão ou técnicas de eversão do falo. Neste artigo, apresentamos o método de eversão do falo e comparamos sua eficiência com outras técnicas existentes. Este novo método visa encurtar o tempo de manejo e reduzir os efeitos colaterais físicos nos animais, promovendo o manejo clínico e reprodutivo do cágado-de-barbicha (Phrynops geoffroanus) e espécies relacionadas. Uma amostra de cinquenta indivíduos foi coletada na região central do estado do Piauí, Nordeste do Brasil. O método proposto consiste em remover a cabeça de sua posição de repouso. Os métodos que obtiveram índice de sucesso superior a 80% foram comparados entre si quanto ao tempo de estimulação necessário para a eversão do falo. O método aqui proposto alcançou 100% de eficiência na determinação do sexo de espécimes com comprimento de carapaça linear entre 10 e 34 cm. Além disso, quando comparado ao segundo método mais eficiente, reduziu substancialmente o tempo necessário para o manejo dos espécimes (91%), evitando possíveis sequelas nos indivíduos manuseados.

Phallus eversion sexing in Phrynops geoffroanus (Testudines: Chelidae): a new non-invasive approach / Sexagem por eversão do falo em Phrynops geoffroanus (Testudines: Chelidae): uma nova abordagem não invasiva

Abstract The sexing of species is an important tool for population management. In tortoises and turtles, sexing is usually done according to secondary characteristics, such as plastron morphology or phallus eversion techniques. In this paper, we present the phallus eversion method and compare its efficiency to other existing techniques. This new method aims at shortening the management time and reducing the physical aftereffects on the animals, fostering the clinical and reproductive management of Geoffroy's side-necked turtle (Phrynops geoffroanus) and related species. A sample of fifty individuals was taken in the central region of Piauí state, Northeastern Brazil. The proposed method consisted of moving the head from its resting position. The methods achieving a success rate higher than 80% were compared to each other as for the stimulation time required for phallus eversion. The method as here proposed achieved 100% efficiency in the sex determination of specimens with a linear carapace length between 10 and 34 cm. Also, when compared to the second most efficient method, it substantially reduced the time needed for managing the specimens (91%), avoiding possible sequelae in the individuals handled.

Resumo A sexagem das espécies é uma ferramenta importante para o manejo populacional. Em tartarugas, cágados e jabutis, a sexagem geralmente é feita de acordo com características secundárias, como morfologia do plastrão ou técnicas de eversão do falo. Neste artigo, apresentamos o método de eversão do falo e comparamos sua eficiência com outras técnicas existentes. Este novo método visa encurtar o tempo de manejo e reduzir os efeitos colaterais físicos nos animais, promovendo o manejo clínico e reprodutivo do cágado-de-barbicha (Phrynops geoffroanus) e espécies relacionadas. Uma amostra de cinquenta indivíduos foi coletada na região central do estado do Piauí, Nordeste do Brasil. O método proposto consiste em remover a cabeça de sua posição de repouso. Os métodos que obtiveram índice de sucesso superior a 80% foram comparados entre si quanto ao tempo de estimulação necessário para a eversão do falo. O método aqui proposto alcançou 100% de eficiência na determinação do sexo de espécimes com comprimento de carapaça linear entre 10 e 34 cm. Além disso, quando comparado ao segundo método mais eficiente, reduziu substancialmente o tempo necessário para o manejo dos espécimes (91%), evitando possíveis sequelas nos indivíduos manuseados.

Health literacy and diabetic retinopathy

Health literacy (HL) is defined as a cognitive and social skill that determines the motivation and ability of individuals to understand and use information to promote and maintain proper health. Inadequate HL has been associated with worse outcomes in diabetes control, poor self-care, and higher hospitalization rates for some chronic diseases. We hypothesized that HL influences the prevalence of diabetic retinopathy (DR) among individuals with type 2 diabetes mellitus (T2DM) and that inadequate glycemic control would mediate this association. This was a cross-sectional study carried out with 288 participants of the "Brazilian Diabetes Study" cohort. Inclusion criteria were people diagnosed with T2DM aged between 40 and 70 years and ability to read and write. In the adequate HL group, DR was found in 16.5% of participants and in the inadequate HL group, it was found in 32.8% (P=0.0081). Individuals with inadequate HL had a higher risk of having DR, and this association was still statistically significant after adjusting for HbA1c, low-density lipoprotein cholesterol, systolic blood pressure, and diastolic blood pressure. In conclusion, HL is related to DR without the mediation of classical clinical variables.

Gastroesophageal tube of the Iguana iguana (Iguanidae): histological description, histochemical and immunohistochemical analysis of 5-HT and SS cells / Tubo gastroesofágico da Iguana iguana (Iguanidae): descrição histológica, histoquímica e análise imunohistoquímica de células 5-HT e SS

The work aims were to describe the histological and histochemical structure of the gastroesophageal tube of Iguana iguana and verify the occurrence and distribution of immunoreactive serotonin (5-HT) and somatostatin (SS) cells. Fragments of the gastrointestinal tract (GIT) of five iguanas were which underwent standard histological and immunohistochemistry technique. Immunoreactive cells for 5-HT and SS were quantified using the STEPanizer. The oesophagus has ciliated columnar pseudostratified epithelium with staining Alcian blue (AB) + and goblet cells highly reactive to periodic acid Schiff (PAS). In the cervical oesophagus, the numerical density of 5-HT cells per unit area (QA [5-HT cells]/µm2) was 4.6x10-2 ± 2.0 and celomatic oesophagus presented QA = 4.0x10-2 ± 1.0. The epithelium of the stomach is simple columnar, PAS and AB +. The cranial and middle regions of the stomach presented (QA [5-HT cells]/µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 and the caudal region, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. The SS cells were only observed in the caudal stomach, with numerical density (QA [SS cells]/µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9 In I. iguana, variation was observed in terms of the distribution of mucus secretions and the pattern of occurrence of serotonin and somatostatin-secreting enteroendocrine cells in the TGI, which possibly will result in an interspecific adaptive response.

Os objetivos do trabalho foram descrever a estrutura histológica e histoquímica do tubo gastroesofágico da Iguana iguana e verificar a ocorrência e distribuição de células serotonina (5-HT) e somatostatina (SS) imunorreativas. Fragmentos do trato gastrointestinal (TGI) de cinco iguanas foram submetidos à técnica histológica e imunohistoquímica padrão. As células imunorreativas para 5-HT e SS foram quantificadas usando o STEPanizer. O esôfago apresenta epitélio pseudoestratificado colunar ciliado Alcian blue (AB) positivo, com células caliciformes altamente reativas ao ácido periódico de Schiff (PAS). No esôfago cervical, a densidade numérica de células 5-HT por unidade de área (QA [células 5-HT] / µm2) foi de 4.6x10-2 ± 2.0 e o esôfago celomático apresentou QA = 4.0x10-2 ± 1.0. O epitélio do estômago é colunar simples, PAS e AB positivo. As regiões cranial e média do estômago apresentaram (QA [células 5-HT] / µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 e a região caudal, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. As células SS foram observadas apenas no estômago caudal, com densidade numérica (QA [células SS] / µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9. Em I. iguana, foi observada variações em termos da distribuição das secreções de muco e padrão de ocorrência das células enteroendócrinas secretoras de serotonina e somatostatina no TGI, o que possivelmente reflete uma resposta adaptativa interespecifica.

Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) in Campos do Jordão State Park, São Paulo, Brazil / Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) no Parque Estadual de Campos do Jordão, São Paulo, Brasil

The aim of this paper was recording the occurrence of the species Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) in lotic systems of the State of São Paulo. Specimens were collected in Sapucaí River, located in Campos do Jordão State Park. The mapping of geographical distribution of this species is of interest to public health since L. variegatus may be an intermediate host of Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda, Dioctophymatidae), a parasite of recognized zoonotic potential. Distribution data serves as a basis for environmental monitoring and evaluation, being essential to map possible cases of the disease (Dioctophimosis) and provide information to health professionals.

O objetivo deste trabalho foi registrar a ocorrência de Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) em um sistema lótico do Estado de São Paulo. Os espécimes foram coletados no rio Sapucaí, localizado no Parque Estadual de Campos do Jordão. O mapeamento da distribuição geográfica desta espécie é de interesse para saúde pública uma vez que L. variegatus pode ser um hospedeiro intermediário de Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda, Dioctophymatidae), parasito de reconhecido potencial zoonótico. Dados de distribuição servem de base para monitoramento e avaliação ambiental, sendo essenciais para mapear possíveis casos da doença (Dioctofimose) e fornecer informações para profissionais de saúde.

Gastroesophageal tube of the Iguana iguana (Iguanidae): histological description, histochemical and immunohistochemical analysis of 5-HT and SS cells

Abstract The work aims were to describe the histological and histochemical structure of the gastroesophageal tube of Iguana iguana and verify the occurrence and distribution of immunoreactive serotonin (5-HT) and somatostatin (SS) cells. Fragments of the gastrointestinal tract (GIT) of five iguanas were which underwent standard histological and immunohistochemistry technique. Immunoreactive cells for 5-HT and SS were quantified using the STEPanizer. The oesophagus has ciliated columnar pseudostratified epithelium with staining Alcian blue (AB) + and goblet cells highly reactive to periodic acid Schiff (PAS). In the cervical oesophagus, the numerical density of 5-HT cells per unit area (QA [5-HT cells]/µm2) was 4.6x10-2 ± 2.0 and celomatic oesophagus presented QA = 4.0x10-2 ± 1.0. The epithelium of the stomach is simple columnar, PAS and AB +. The cranial and middle regions of the stomach presented (QA [5-HT cells]/µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 and the caudal region, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. The SS cells were only observed in the caudal stomach, with numerical density (QA [SS cells]/µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9 In I. iguana, variation was observed in terms of the distribution of mucus secretions and the pattern of occurrence of serotonin and somatostatin-secreting enteroendocrine cells in the TGI, which possibly will result in an interspecific adaptive response.

Resumo Os objetivos do trabalho foram descrever a estrutura histológica e histoquímica do tubo gastroesofágico da Iguana iguana e verificar a ocorrência e distribuição de células serotonina (5-HT) e somatostatina (SS) imunorreativas. Fragmentos do trato gastrointestinal (TGI) de cinco iguanas foram submetidos à técnica histológica e imunohistoquímica padrão. As células imunorreativas para 5-HT e SS foram quantificadas usando o STEPanizer. O esôfago apresenta epitélio pseudoestratificado colunar ciliado Alcian blue (AB) positivo, com células caliciformes altamente reativas ao ácido periódico de Schiff (PAS). No esôfago cervical, a densidade numérica de células 5-HT por unidade de área (QA [células 5-HT] / µm2) foi de 4.6x10-2 ± 2.0 e o esôfago celomático apresentou QA = 4.0x10-2 ± 1.0. O epitélio do estômago é colunar simples, PAS e AB positivo. As regiões cranial e média do estômago apresentaram (QA [células 5-HT] / µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 e a região caudal, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. As células SS foram observadas apenas no estômago caudal, com densidade numérica (QA [células SS] / µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9. Em I. iguana, foi observada variações em termos da distribuição das secreções de muco e padrão de ocorrência das células enteroendócrinas secretoras de serotonina e somatostatina no TGI, o que possivelmente reflete uma resposta adaptativa interespecifica.

Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) in Campos do Jordão State Park, São Paulo, Brazil

Abstract The aim of this paper was recording the occurrence of the species Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) in lotic systems of the State of São Paulo. Specimens were collected in Sapucaí River, located in Campos do Jordão State Park. The mapping of geographical distribution of this species is of interest to public health since L. variegatus may be an intermediate host of Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda, Dioctophymatidae), a parasite of recognized zoonotic potential. Distribution data serves as a basis for environmental monitoring and evaluation, being essential to map possible cases of the disease (Dioctophimosis) and provide information to health professionals.

Resumo O objetivo deste trabalho foi registrar a ocorrência de Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) em um sistema lótico do Estado de São Paulo. Os espécimes foram coletados no rio Sapucaí, localizado no Parque Estadual de Campos do Jordão. O mapeamento da distribuição geográfica desta espécie é de interesse para saúde pública uma vez que L. variegatus pode ser um hospedeiro intermediário de Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda, Dioctophymatidae), parasito de reconhecido potencial zoonótico. Dados de distribuição servem de base para monitoramento e avaliação ambiental, sendo essenciais para mapear possíveis casos da doença (Dioctofimose) e fornecer informações para profissionais de saúde.

Gastroesophageal tube of the Iguana iguana (Iguanidae): histological description, histochemical and immunohistochemical analysis of 5-HT and SS cells / Tubo gastroesofágico da Iguana iguana (Iguanidae): descrição histológica, histoquímica e análise imunohistoquímica de células 5-HT e SS

Abstract The work aims were to describe the histological and histochemical structure of the gastroesophageal tube of Iguana iguana and verify the occurrence and distribution of immunoreactive serotonin (5-HT) and somatostatin (SS) cells. Fragments of the gastrointestinal tract (GIT) of five iguanas were which underwent standard histological and immunohistochemistry technique. Immunoreactive cells for 5-HT and SS were quantified using the STEPanizer. The oesophagus has ciliated columnar pseudostratified epithelium with staining Alcian blue (AB) + and goblet cells highly reactive to periodic acid Schiff (PAS). In the cervical oesophagus, the numerical density of 5-HT cells per unit area (QA [5-HT cells]/µm2) was 4.6x10-2 ± 2.0 and celomatic oesophagus presented QA = 4.0x10-2 ± 1.0. The epithelium of the stomach is simple columnar, PAS and AB +. The cranial and middle regions of the stomach presented (QA [5-HT cells]/µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 and the caudal region, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. The SS cells were only observed in the caudal stomach, with numerical density (QA [SS cells]/µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9 In I. iguana, variation was observed in terms of the distribution of mucus secretions and the pattern of occurrence of serotonin and somatostatin-secreting enteroendocrine cells in the TGI, which possibly will result in an interspecific adaptive response.

Resumo Os objetivos do trabalho foram descrever a estrutura histológica e histoquímica do tubo gastroesofágico da Iguana iguana e verificar a ocorrência e distribuição de células serotonina (5-HT) e somatostatina (SS) imunorreativas. Fragmentos do trato gastrointestinal (TGI) de cinco iguanas foram submetidos à técnica histológica e imunohistoquímica padrão. As células imunorreativas para 5-HT e SS foram quantificadas usando o STEPanizer. O esôfago apresenta epitélio pseudoestratificado colunar ciliado Alcian blue (AB) positivo, com células caliciformes altamente reativas ao ácido periódico de Schiff (PAS). No esôfago cervical, a densidade numérica de células 5-HT por unidade de área (QA [células 5-HT] / µm2) foi de 4.6x10-2 ± 2.0 e o esôfago celomático apresentou QA = 4.0x10-2 ± 1.0. O epitélio do estômago é colunar simples, PAS e AB positivo. As regiões cranial e média do estômago apresentaram (QA [células 5-HT] / µm2) = 6.18x10-2 ± 3.2 e a região caudal, QA = 0.6x10-2 ± 0.2. As células SS foram observadas apenas no estômago caudal, com densidade numérica (QA [células SS] / µm2) = 1.4x10-2 ± 0.9. Em I. iguana, foi observada variações em termos da distribuição das secreções de muco e padrão de ocorrência das células enteroendócrinas secretoras de serotonina e somatostatina no TGI, o que possivelmente reflete uma resposta adaptativa interespecifica.

Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) in Campos do Jordão State Park, São Paulo, Brazil / Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) no Parque Estadual de Campos do Jordão, São Paulo, Brasil

Abstract The aim of this paper was recording the occurrence of the species Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) in lotic systems of the State of São Paulo. Specimens were collected in Sapucaí River, located in Campos do Jordão State Park. The mapping of geographical distribution of this species is of interest to public health since L. variegatus may be an intermediate host of Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda, Dioctophymatidae), a parasite of recognized zoonotic potential. Distribution data serves as a basis for environmental monitoring and evaluation, being essential to map possible cases of the disease (Dioctophimosis) and provide information to health professionals.

Resumo O objetivo deste trabalho foi registrar a ocorrência de Lumbriculus variegatus (Müller, 1774) (Oligochaeta, Lumbriculidae) em um sistema lótico do Estado de São Paulo. Os espécimes foram coletados no rio Sapucaí, localizado no Parque Estadual de Campos do Jordão. O mapeamento da distribuição geográfica desta espécie é de interesse para saúde pública uma vez que L. variegatus pode ser um hospedeiro intermediário de Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda, Dioctophymatidae), parasito de reconhecido potencial zoonótico. Dados de distribuição servem de base para monitoramento e avaliação ambiental, sendo essenciais para mapear possíveis casos da doença (Dioctofimose) e fornecer informações para profissionais de saúde.

Anti-inflammatory, procollagen, and wound repair properties of topical insulin gel

Diabetes mellitus is associated with impaired wound healing. The topical use of insulin is a promising therapy because it may favor all phases of the wound healing process. This study aimed to investigate the therapeutic outcomes of insulin gel in wounds of hyperglycemic mice. After diabetes induction, a 1-cm2 full-thickness wound was created on each animal's dorsum. The lesions were treated daily for 14 days with insulin gel (insulin group) or vehicle gel without insulin (vehicle group). Tissue samples were extracted on days 4, 7, 10, and 14 after the creation of the lesion. The samples were analyzed with hematoxylin/eosin and Sirius red staining, immunohistochemistry, Bio-Plex immunoassays, and western blotting. Insulin gel favored re-epithelialization at day 10 and increased the organization and deposition of collagen. Additionally, it modulated the expression of cytokines (interleukin (IL)-4 and IL-10) and increased the expression of arginase I, VEGF receptor 1, and VEGF on day 10. Activation of the insulin signaling pathway occurred via IRβ, IRS1, and IKK on day 10 and activation of Akt and IRS1 on day 14. These results suggested that insulin gel improved wound healing in hyperglycemic mice by modulating the expression of inflammatory factors, growth factors, and proteins of the insulin signaling pathway.

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679 / O metabólito vegetal 5-pentadecil resorcinol é produzido pelo fungo amazônico Penicillium sclerotiorum LM 5679

Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.

Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679

Abstract Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.

Resumo Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).

Plant metabolite 5-pentadecyl resorcinol is produced by the Amazonian fungus Penicillium sclerotiorum LM 5679 / O metabólito vegetal 5-pentadecil resorcinol é produzido pelo fungo amazônico Penicillium sclerotiorum LM 5679

Since the classic studies of Alexander Flemming, Penicillium strains have been known as a rich source of antimicrobial substances. Recent studies have identified novel metabolites produced by Penicillium sclerotiorum that have antibacterial, antifouling and pharmaceutical activities. Here, we report the isolation of a P. sclerotiorum (LM 5679) from Amazonian soil and carry out a culture-based study to determine whether it can produce any novel secondary metabolite(s) that are not thus-far reported for this genus. Using a submerged culture system, secondary metabolites were recovered by solvent extract followed by thin-layer chromatography, nuclear magnetic resonance, and mass spectroscopy. One novel secondary metabolite was isolated from P. sclerotiorum (LM 5679); the phenolic compound 5-pentadecyl resorcinol widely known as an antifungal, that is produced by diverse plant species. This metabolite was not reported previously in any Penicillium species and was only found once before in fungi (that time, in a Fusarium). Here, we discuss the known activities of 5-pentadecyl resorcinol in the context of its mode-of-action as a hydrophobic (chaotropicity-mediated) stressor.

Desde os estudos clássicos de Alexander Flemming, as cepas de Penicillium são conhecidas como uma fonte rica em substâncias antimicrobianas. Estudos recentes identificaram novos metabólitos produzidos pela espécie Penicillium sclerotiorum com atividades antibacteriana, anti-incrustante e farmacêutica. Aqui, relatamos o isolamento de uma colônia de P. sclerotiorum (LM 5679) do solo amazônico e relatamos também o estudo baseado em cultura para determinar se ele pode produzir qualquer novo metabólito (s) secundário (s) que não foram relatados até agora para este gênero. Usando um sistema de cultura submerso, os metabólitos secundários foram recuperados por extrato de solvente seguido por cromatografia em camada delgada, ressonância magnética nuclear e espectroscopia de massa. Um novo metabólito secundário foi isolado de P. sclerotiorum (LM 5679); o composto fenólico 5-pentadecil resorcinol que é amplamente conhecido como um antifúngico que é produzido por diversas espécies de plantas. Este metabólito não foi relatado anteriormente em nenhuma espécie de Penicillium, e foi encontrado apenas uma vez em fungos (Fusarium). Aqui, discutimos as atividades conhecidas do 5-pentadecil resorcinol no contexto de seu modo de ação como um estressor hidrofóbico (mediado pela caotropicidade).

Melittin-induced metabolic changes on the Madin-Darby Bovine Kidney cell line / [Mudanças metabólicas induzidas por melitina em células da linhagem Madin-Darby Bovine Kidney]

In this study, the toxic effects of melittin on Madin-Darby Bovine Kidney cells (MDBK) were analyzed with respect to mitochondrial functionality by reduction of MTT and flow cytometry, apoptosis potential, necrosis, oxygen reactive species (ROS) production, lipid peroxidation, and DNA fragmentation using flow cytometry and cell membrane destabilization by confocal microscopy. The toxicity presented dose-dependent characteristics and mitochondrial activity was inhibited by up to 78.24 ±3.59% (P<0.01, n = 6) in MDBK cells exposed to melittin (10µg/mL). Flow cytometry analysis revealed that melittin at 2µg/mL had the highest necrosis rate (P<0.05) for the cells. The lipoperoxidation of the membranes was also higher at 2µg/mL of melittin (P<0.05), which was further confirmed by the microphotographs obtained by confocal microscopy. The highest ROS production occurred when the cells were exposed to 2.5µg/mL melittin (P<0.05), and this concentration also increased DNA fragmentation (P<0.05). There was a significative and positive correlation between the lipoperoxidation of membranes with ROS (R=0.4158), mitochondrial functionality (R=0.4149), and apoptosis (R=0.4978). Thus, the oxidative stress generated by melittin culminates in the elevation of intracellular ROS that initiates a cascade of toxic events in MDBK cells.(AU)

Neste estudo, os efeitos tóxicos da melitina em células Madin-Darby Bovine Kidney (MDBK) foram analisados quanto à funcionalidade mitocondrial, por redução de MTT e citometria de fluxo, potencial de apoptose, necrose, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), peroxidação lipídica e fragmentação de DNA, utilizando-se citometria de fluxo e desestabilização da membrana celular, por microscopia confocal. A toxicidade apresentou características dose-dependentes e a atividade mitocondrial foi inibida até 78,24±3,59% (P<0,01, n = 6) em células MDBK expostas à melitina (10µg/mL). Análises por citometria de fluxo revelaram que a melitina a 2µg/mL apresentou o maior índice necrótico celular (P<0,05). A maior lipoperoxidação de membranas também foi na concentração de 2µg/mL de melitina (P<0,05), o que foi posteriormente confirmado por microscopia confocal. A maior produção de ROS aconteceu quando as células foram expostas a 2,5µg/mL de melitina (P<0,05), e essa concentração também aumentou a fragmentação de DNA (P<0,05). Houve uma significativa correlação positiva entre a lipoperoxidação de membranas e a produção de ROS (R=0,4158), funcionalidade mitocondrial (R=0,4149) e apoptose (R=0,4978). Portanto, o estresse oxidativo gerado pela melitina culminou na elevação de ROS intracelular, que inicia uma cascata de eventos tóxicos nas células MDBK.(AU)